本发明公开了用于鉴定长岭发垫刃线虫的分子标记,属于植物线虫鉴定领域,该分子标记为520bp的DNA片段。还公开了由SEQ ID No .2和SEQ ID No .3所示的核苷酸序列组成的该分子标记的PCR引物。本发明还公开了用于鉴定该线虫的双重PCR的引物及分子标记,以及相应的双重PCR鉴定方法。针对长岭发垫刃线虫设计的引物特异性强,应用该引物扩增所得的分子标记对长岭发垫刃线虫进行鉴定准确度高、可靠性强;其次,该方法检测灵敏度高,且方法简单、检测速度快、效率高;此外,对操作人员要求低。